●  　  ●    　●

近年来，细胞治疗已经成为一种非常有前景的治疗手段，在临床应用方面显示出巨大的应用潜力。细胞治疗包括免疫细胞治疗和干细胞治疗。细胞产品被称为“活”的药物，制备流程复杂，质量控制贯穿研发到临床的各个方面。

国家药品监督管理局药品审评中心发布的《人源性干细胞产品药学研究与评价技术指导原则（征求意见稿）》和《免疫细胞治疗产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》中都指出细胞计数和活率是评价细胞产品的基础和重要指标。因此，需要建立准确的细胞计数及活率检测方法，并建立产品的放行标准。

虽然现在有很多自动化细胞计数仪，但人工计数仍然是最简便易行的方法且被广大实验室使用，大部分智能化的计数仪器所采用的基本原理还是与血球计数板方法一样。仪器只对“标本”负责，上机前仍需要规范的细胞样品准备和加样过程。

1

镜检法（血球计数板）

自18世纪以来，使用血球计数板进行显微镜计数，一直被认为是细胞计数的“金标准”。采用标准化的步骤实现单个细胞计数，从而计算细胞的浓度。通过添加台盼蓝染料来确定细胞活率。

血球计数板法为经典的细胞计数方法，可以在不同的情况下具有多功能和适应性。在显微镜下直接测定，操作便捷，成本低，可较为准确了解细胞状态。但是，样品中有较多杂质、碎片时，易被计算在内，导致结果偏高。该方法受主观因素影响较大，对操作人员的经验及操作熟练度有一定要求，不适合多样本、连续检测。

2

图像分析法

▉ 台盼蓝染色法

正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，细胞不被染色。而死细胞的胞膜不完整，通透性增加，可使台盼蓝渗入将细胞染成蓝色。因此，借助台盼蓝染色可以简单、快速地区分活细胞和死细胞。

台盼蓝染色法操作简单，但其检测原理有一定局限性：

1）细胞活率低于80%时，碎片、杂质、台盼蓝结晶等会干扰计数结果；

▉ 双荧光染色法

3

4

流式细胞术操作相对复杂，对人员要求要高，无法直接观察到细胞状态，易受细胞碎片、杂质等影响，所测浓度和活率误差较大。因此，一般不用于细胞计数，多用于细胞群分析，且检测成本较高。

综上，标准化的手动操作步骤、稳定的设备性能测试、准确的细胞识别参数设置、多人多次测试等，对于细胞浓度和活率检测结果的准确性和一致性至关重要。

明鉴细胞检测依据法规要求，参考现有行业检测技术，可提供符合法规规定的细胞浓度和活率检测服务，包括镜检法、台盼蓝染色法、AO/PI双荧光染色法、流式细胞术检测法。同时，我司作为大湾区首个CNAS和CMA双认证的生物制品质量CRO平台，也是目前大湾区首个获得细胞计数和细胞活率两个项目CNAS认可的机构。