上篇我们讨论到，在病毒类生物制品生产时用华龛微载体（V系列）结合生物反应器进行贴壁细胞的悬浮式培养，详细内容可以直接通过下方文章链接查看。

文章链接：疫路有你 | 病毒生产用3D多孔可降解微载体（一）：解决方案篇

接下来，我们将分别针对Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）、MDCK细胞（犬肾上皮细胞）及人二倍体细胞在使用华龛微载体（V系列）扩增培养时的具体表现进行讨论。

【Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）】

Vero细胞是于1962年从非洲绿猴的肾脏中分离出来的异倍体贴壁依赖性细胞。1987年，世界卫生组织（WHO）正式批准传代细胞系作为生物制品生产的原料，从此Vero细胞逐渐被批准用于人用疫苗的生产，例如脊髓灰质炎灭活疫苗、口服脊髓灰质炎病毒疫苗和狂犬病毒疫苗等。自2020年初新型冠状病毒肺炎疫情爆发后，Vero细胞也被全球多家企业首选用于新冠疫苗的研发与生产。

邓涛,年悬悬,张家友,黄仕和,杨晓明.新型冠状病毒灭活疫苗研发及应用[J].

中国生物制品学杂志,2021,34(07):761-769.

Vero细胞贴壁能力较强，容易适应微载体培养工艺。使用华龛微载体培养Vero细胞可实现多级反应器连续放大传代培养，细胞密度峰值可达1×10⁷/mL，容易达成工艺放大。

Vero细胞在华龛微载体（左）与传统球形微载体（右）上的生长情况对比，标尺为250μm。

【MDCK细胞（犬肾上皮细胞）】

MDCK细胞是于1958年从科克猎犬的肾脏中分离出来的贴壁依赖性上皮样细胞。美国FDA已于2012年批准Flucelvax®上市，这是美国市场中首个源于细胞培养技术的疫苗，取代了基于鸡胚的传统工艺，其采用的正是MDCK细胞。

使用华龛微载体培养MDCK细胞可实现多级反应器连续放大传代培养，接毒前细胞密度峰值可达近1×10⁷/mL。

【人二倍体细胞】

人二倍体细胞是来源于正常人胎儿组织的原代间质类细胞。相较于动物细胞，人二倍体细胞无潜在致癌性、无动物源因子污染，是理想的生物制品原料细胞；但其细胞倍增时间长、传代次数非常有限，难以实现放大培养，也限制了实际应用。

使用华龛微载体培养人二倍体细胞株，细胞活率与扩增效果明显优于传统微载体，收获时每克微载体可承载的细胞量是传统微载体的3~4倍，细胞密度可达2×10⁶/mL。

人二倍体细胞在华龛微载体（左）与传统球形微载体（右）上的生长情况对比，标尺为500μm。

【结语】

华龛微载体在数种常用的贴壁细胞培养中均表现出优异的扩增效果。基于如此突出的细胞扩增效果，华龛微载体培养的细胞产毒表现如何呢？敬请期待！

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